方法：通過上海安亭科學(xué)儀器廠生產(chǎn)的TDL-5-A普通低速離心機(jī)以600r/min離心6min摔裂小鼠完整囊胚，剝離出未分化的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)，培養(yǎng)鑒定干細(xì)胞。

結(jié)果：利用低速離心機(jī)進(jìn)行速離心可將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)從完整囊胚中剝離出來，接種在絲裂霉素處理過的飼養(yǎng)細(xì)胞上培養(yǎng)時，能在2-3d獲得巢狀增殖的干細(xì)胞集落，且能反復(fù)傳代、凍存復(fù)蘇，并保持胚胎干細(xì)胞多個標(biāo)志物的特征。

結(jié)論：利用上海安亭科學(xué)儀器廠的低速離心機(jī)進(jìn)行摔裂完整囊胚法可獲得胚胎f細(xì)胞系，且操作方便、經(jīng)濟(jì)可行。

飼養(yǎng)層細(xì)胞的制備：無菌取出妊娠13—14d的昆明小鼠鼠胚，去頭、四肢及內(nèi)臟后，剪碎成約1 1'1"1／11組織塊，2.5g/L胰蛋白酶／體積分?jǐn)?shù)為0.02％室溫消化20min后，加入等量PBS自然沉降。

取上層細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)入含體積分?jǐn)?shù)為10％FBS的高糖飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基中終止消化，置于低速離心機(jī)中離心后去上清，用飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基重懸后，置于培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，常規(guī)消化、傳代或凍存?zhèn)溆�。�?dāng)培養(yǎng)瓶中細(xì)胞鋪滿后更換含10111g／LMMC的飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)基，孵育2.5h，PBS洗滌5次，消化后接種于體積分?jǐn)?shù)為0．1％ 明膠預(yù)處理30 min的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，即得飼養(yǎng)層細(xì)胞。完整囊胚。置于10mL玻璃離心管內(nèi)，置于離心機(jī)中以600r/min離心6 min，重懸細(xì)胞，接種于含飼養(yǎng)層細(xì)胞的培養(yǎng)瓶內(nèi)，置于37℃ 、體積分?jǐn)?shù)為5％ CO，飽和濕度培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

證明用實驗室常規(guī)用的離心機(jī)直接離心摔裂完整的胚囊是實際可行的，