上海安亭科學離心機離心純化方法的選擇

常用的離心純化方法包括以下三種：差速離心法，速率區(qū)帶離心法，等密度區(qū)帶離心法。

差速離心法：常用于生化樣品的粗制品提取利用不同的懸浮粒子在離心力場中沉降系數(shù)的差別,在同一離心條件下,不同粒子沉降速度不同,通過不斷增加相對離心力,使一個非均勻混合液體分散系統(tǒng)中各種大小、形狀不同的粒子分層沉淀。操作過程中一般是在第一級離心后將上清液與沉淀分開,然后將上清液再在更高轉(zhuǎn)速條件下離心,分離出第二部分沉淀,如此往復逐級加高轉(zhuǎn)速,逐級分離出所需要的物質(zhì)。差速離心的分辨率不高,沉淀系數(shù)在同一個數(shù)量級內(nèi)的各種粒子不容易分開,常用于生化樣品的粗制品提取。

速率區(qū)帶離心法：是一種不完全的沉降分離,沉降效果受物質(zhì)本身物理尺度的影響較大,一般應用在物質(zhì)大小相異而密度相同的情況, 是指根據(jù)待分離的粒子在離心力作用下，在梯度液中沉降速度的不同，離心后具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內(nèi)，形成幾條分開的樣品區(qū)帶，達到彼此分離的目的。比如要從靜脈血中分離出單個核細胞，前一種分離液Ficoll將血液中的所有單個核細胞（淋巴細胞和單核細胞）分為一個層，同時提取。而Percoll分離液將血液中淋巴細胞和單核細胞分為兩個梯度層，分別提取。梯度液在離心過程中以及離心完畢后取樣時，起著支持介質(zhì)和穩(wěn)定劑的作用,避免因機械振動而引起已分層的粒子重懸。采用速率區(qū)帶離心法時，需要嚴格控制離心時間,既要有足夠的時間使各種粒子在介質(zhì)梯度液中形成區(qū)帶,又要避免任一待分離粒子形成沉淀狀態(tài)。

等密度區(qū)帶離心法：是指液體分散體系中不同顆粒存在浮力密度差時，在離心力場下，顆粒或向下沉降，或向上浮起，一直沿梯度移動到它們密度恰好相等的位置上，即等密度點，形成區(qū)帶的離心方法。等密度區(qū)帶離心的離心效果取決于顆粒的浮力密度差，密度差越大，分離效果越好，與顆粒的大小和形狀無關，但后兩者決定著達到平衡的速率、時間和區(qū)帶的寬度。該方法的特點：1.與樣品粒子的密度有關。2.與樣品粒子的大小和其他參數(shù)無關 。3.轉(zhuǎn)速、溫度不變,則延長離心時間也不能改變這些粒子的成帶位置。