壓力蒸汽滅菌的生物監(jiān)測法是利用嗜熱脂肪桿菌芽孢的活菌對滅菌效能進行監(jiān)測, 它能及時有效反映物品的滅菌質量, 保證了臨床使用的安全性。現(xiàn)將我院生物監(jiān)測的干濕式恒溫箱培養(yǎng)介紹如下。

1 材料與方法

1. 1 材料

生物指示劑嗜熱脂肪桿菌( ATCC7953 )芽孢, 北京四環(huán)衛(wèi)生藥械廠生產(chǎn), 含菌量5 x105 ~  5x106 c fu /片(自含式),配備專用的56℃培養(yǎng)箱干濕式各1臺, 分別由上海精宏實驗設備有限公司生產(chǎn)的電熱恒溫水浴箱和上海博迅實業(yè)有限公司生產(chǎn)的隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱。

1. 2 方法

將每組2支生物指示劑管置于標準試驗包中心部位。試驗包分別放置于LDZM-60KCS智能型帶干燥功能壓力蒸汽滅菌器（上海申安醫(yī)療器械廠生產(chǎn)）內上層前部, 中層中部, 下層后部(排氣口上方),滅菌器裝載量達90%, 采用的運行程序, 內室蒸汽壓為0.21~0.22MPa內室溫度為132℃~134℃。滅菌8min,干燥10min。連續(xù)監(jiān)測34周次,每周1次。滅菌結束即刻將生物指示劑管取出, 蓋面朝上垂直握于手中用鑷子夾住指示管下端尖部, 將管內瓿夾碎,讓培養(yǎng)液流出浸沒菌片,充分振搖, 然后分別放置于干濕式的培養(yǎng)箱內培養(yǎng)48h, 同時放置1支未經(jīng)滅菌程序處理的生物指示劑管作陽性對照, 管內培養(yǎng)液由紫色變?yōu)辄S色, 即表示有菌生長, 判斷滅菌不合格, 如仍為紫色即表示無菌生長。同時陽性對照生長正常判斷滅菌合格。

2 結果

連續(xù)生物監(jiān)測34次中, 干燥室培養(yǎng)滅菌合格34次, 合格率為100%, 而濕式培養(yǎng)箱培養(yǎng)滅菌合格22次, 合格率75%。

3 討論

必須選擇同批號的生物指示劑作為對照, 且對照管必須為陽性, 如果對照管出現(xiàn)陰性, 其原因可能是菌片上微生物本已死亡或培養(yǎng)基已失效或培養(yǎng)溫度不符合要求。干燥室培養(yǎng)箱恒溫效果好, 生物指示劑蓋面上的三個小孔不宜受到污染而出現(xiàn)假陽性結果, 而濕式水浴恒溫培養(yǎng)箱在56度時仍有部分的熱水汽通過指示劑蓋面上的三個小孔進入而引起培養(yǎng)基污染而出現(xiàn)陽性結果, 從而影響生物監(jiān)測的準確判斷。任何生物指示劑呈陽性結果時,均應認為是滅菌失敗。出現(xiàn)陽性結果時應采取相應的措施,要將所有物品收回重新處理;檢查滅菌過程的各個方面(滅菌器, 裝載過程和包裝技術等),找出滅菌失敗的可能原因;用幾個生物指示劑重新測試滅菌器的工作狀態(tài); 在生物指示劑結果都是陰性前不要使用該滅菌器;另外還要考慮生物指示劑本身是否符合質量要求及培養(yǎng)壞境等情況。根據(jù)醫(yī)院消毒供應中心管理規(guī)范每周必須對滅菌器做次生物監(jiān)測, 是控制消毒滅菌質量的有效可靠的方法,有利于及時發(fā)現(xiàn)滅菌過程中的新問題, 并及時解決, 保證了醫(yī)院滅菌物品供應的高質量。